? ? ?病毒的轉(zhuǎn)導(dǎo)效率比常規(guī)真核表達(dá)載體高很多，因此特別適合于介導(dǎo)外源基因在難轉(zhuǎn)染甚至無(wú)法轉(zhuǎn)染的哺乳動(dòng)物細(xì)胞中表達(dá)?，F(xiàn)在常用的病毒有慢病毒（Lentiviral, LV）、腺病毒（adenovirus，Ad）、腺相關(guān)病毒（Adeno-associated virus，AAV）以及逆轉(zhuǎn)錄病毒（retrovirus，RV），這些病毒載體在提高基因表達(dá)量、縮短實(shí)驗(yàn)周期上各有優(yōu)勢(shì)，根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康牟煌?，需要選擇合適的病毒進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究。今天小編先為大家介紹一下實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)中慢病毒和腺病毒該如何選擇，具體可根據(jù)它們各自的特點(diǎn)來(lái)決定（表1）：

表1 慢病毒和腺病毒的優(yōu)缺點(diǎn)

但是對(duì)于很多實(shí)驗(yàn)來(lái)說(shuō)，選擇腺病毒優(yōu)勢(shì)更大，并且多數(shù)情況下腺病毒是可以替代慢病毒來(lái)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)的：

1. 后續(xù)實(shí)驗(yàn)周期不太長(zhǎng)（一個(gè)月內(nèi)）。選擇腺病毒比慢病毒效率更高，用慢病毒的話感染效率不會(huì)太高，效率高的話也就70%到80%這樣，不能直接進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)，需要篩選穩(wěn)定細(xì)胞株，而篩選穩(wěn)定細(xì)胞株時(shí)間至少需要兩周時(shí)間，篩選過(guò)程不順利的話，需要的時(shí)間更多，會(huì)耽誤實(shí)驗(yàn)。而腺病毒感染效率高，很多細(xì)胞的效率可以達(dá)到99%以上，這樣就不需要花費(fèi)額外的時(shí)間篩選穩(wěn)定細(xì)胞株，可直接進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)，對(duì)于實(shí)驗(yàn)時(shí)間和精力上節(jié)省很多。

2. 目的細(xì)胞感染難度大，且后續(xù)實(shí)驗(yàn)不需要建立穩(wěn)定細(xì)胞株。對(duì)于這種情況，更推薦用腺病毒，腺病毒感染效率不僅會(huì)高很多，成本上也會(huì)節(jié)省很多。比如神經(jīng)細(xì)胞，慢病毒感染效率估計(jì)只有30%這樣，要把感染上的細(xì)胞分選出來(lái)繼續(xù)培養(yǎng)才能進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)，但是很多神經(jīng)細(xì)胞（腫瘤細(xì)胞除外）都是不可傳代的，如果篩選后幾乎剩不了多少細(xì)胞，可能就無(wú)法完成后續(xù)實(shí)驗(yàn)。但是如果用腺病毒就不會(huì)出現(xiàn)這樣的情況，腺病毒感染效率會(huì)比慢病毒高很多（可以達(dá)到 70%左右），這樣篩選出來(lái)的細(xì)胞可以直接進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)，節(jié)省了時(shí)間成本。

3. 要進(jìn)行動(dòng)物實(shí)驗(yàn)。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)需要的病毒量大，且病毒的滴度要很高，這樣才能達(dá)到最小體積注射足夠病毒的目的。慢病毒滴度較低，一般達(dá)不到動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的要求。純化腺病毒滴度可達(dá)到10PFU/ml，只需少量病毒液即可感染一只小鼠或大鼠，一次包裝足以完成一次動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究，同時(shí)腺病毒可以擴(kuò)增的，一次包裝的腺病毒用完后不需要重頭再次包裝，而只要再擴(kuò)增純化即可，這樣在經(jīng)濟(jì)成本和時(shí)間成本上都會(huì)節(jié)省很多。

以上便是慢病毒和腺病毒的選擇參考，希望對(duì)大家有所幫助。另外，對(duì)于動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，通常情況下使用AAV更有優(yōu)勢(shì)，其安全性高、免疫源性低、適用范圍廣、滴度高、且能長(zhǎng)期表達(dá)外源基因，已成為動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的熱門工具。后續(xù)我們將為大家介紹AAV相關(guān)的知識(shí)內(nèi)容，敬請(qǐng)期待。若有任何相關(guān)問(wèn)題，歡迎咨詢漢恒生物！