艾美捷人免疫球蛋白IgG4 ELISA試劑盒,雙抗體“三明治”技術(shù)
艾美捷人免疫球蛋白IgG4 ELISA試劑盒背景:
人類治療性抗體已成為越來越常見的成分藥物的早期發(fā)現(xiàn)和開發(fā)組合以及生物技術(shù)產(chǎn)業(yè)。作為這些藥物臨床前毒理學(xué)評(píng)估的一部分它們通常在非人類靈長類動(dòng)物中進(jìn)行測試,主要是在恒河猴或食蟹猴。為了評(píng)估人體的藥代動(dòng)力學(xué)猴血清中的抗體,必須進(jìn)行能夠區(qū)分實(shí)驗(yàn)引入的人IgG和內(nèi)源性IgG猴IgG。1,2歷史上,由于高度這些免疫球蛋白物種之間的同源性。1,2 Cayman開發(fā)了ELISA格式可準(zhǔn)確測量猴血清中的人IgG,用于治療性人抗體的藥代動(dòng)力學(xué)分析。
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絕大多數(shù)臨床批準(zhǔn)的治療性人類抗體是IgG1和IgG4等型。3由于其“效應(yīng)器”,IgG1更常用功能:1)與效應(yīng)白細(xì)胞上的Fc受體高親和力結(jié)合2) 它修復(fù)了補(bǔ)碼。因此,IgG1介導(dǎo)抗體誘導(dǎo)的細(xì)胞毒性(ADCC)以及補(bǔ)體介導(dǎo)的細(xì)胞毒性。4.5部分在治療應(yīng)用中,ADCC和補(bǔ)體激活均不理想在這種情況下,通常采用IgG4同型。4.5 Cayman提供ELISA試劑盒
專為檢測人類IgG1、人類IgG2或人類IgG4。
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艾美捷人免疫球蛋白IgG4 ELISA試劑盒是一種免疫測定法(即夾心法),可用于定量血漿和血清中的人類?IgG4,而無需事先進(jìn)行樣品純化。標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍為?7.8-500 ng/ml,定量下限?(LLOQ)?為?7.8 ng/ml。該測定已在食蟹猴、恒河猴、小鼠和大鼠的血清中得到驗(yàn)證。
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這種免疫測定法基于雙抗體“三明治”技術(shù)。隨套件提供的微孔板的每個(gè)孔都涂有人IgG特異性抗體。這種抗體將結(jié)合任何引入的人類IgG到井里。與辣根過氧化物酶(HRP)結(jié)合的第二抗體,它也能識(shí)別人類IgG,被添加到形成“三明治”的井中。這個(gè)“三明治”固定在平板上,多余的試劑被洗掉。
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人IgG的濃度通過測定酶使用顯色底物3,3',5,5'-四甲基聯(lián)苯胺的HRP活性(TMB)。經(jīng)過足夠的時(shí)間后,用酸停止反應(yīng),形成能夠在450 nm處測量的具有明顯黃色的產(chǎn)品。這個(gè)顏色的強(qiáng)度與結(jié)合抗體HRP結(jié)合物的量成正比,而結(jié)合抗體HRP-結(jié)合物的數(shù)量與人IgG4的濃度成正比吸光度∝?[抗人IgG HRP]∝?[IgG4]。
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艾美捷人免疫球蛋白IgG4 ELISA試劑盒化學(xué)性質(zhì):
同義詞:人?IgG4?免疫測定?EIA?試劑盒
檢測限:1.1?納克/毫升
檢測范圍:7.8-500?納克/毫升
量化下限:7.8?納克/毫升
貯存:4°C
船運(yùn):美國大陸的濕冰;其他地方可能會(huì)有所不同
穩(wěn)定:≥?6?個(gè)月