抗體在實際應用之前均需對其滴度（效價）、交反反應、特異性和親和力等進行鑒定?？扇苄钥乖苽涞目贵w可選用放射免疫分析法（radioimmune-assay, RIA)、免疫放射分析法（immuno-radiometric assay, IRMA）、酶免疫分析法（enzyme immunoassay, EIA）、熒光免疫分析法（fluorescence immunoassay, FIA）或化學發(fā)光免疫分析法（chemiluminescence immunoassay, CLIA）等。 免疫分析法的常用代號有：①T，為總信號的強度即OD值、每分鐘計數(shù)（cpm）或發(fā)光值等；②B和F分別代表游離或結合的標記抗原（Ag*）或標記抗體（Ab*）的信號強度；③非特異性結合（non-specific binding）即在Ag*或Ab*存在下的結合訊號強度；④Bo%代表標準Ag為零（So）的結合率；⑤ED50，是B%=50的對應劑量。 1.抗體的滴度（效價）

將含抗體（Ab）的血清、培養(yǎng)上清或腹水液用倍比稀釋法配1:500、1:1000、1:2000...1:100000…不同稀釋度的溶液，然后分別加一定量的標記抗原（Ag），共同溫育后分離結合的標記抗原-抗體復合物（Ag*Ab，即B）和未結合（即游離，F(xiàn)）的標記抗原（Ag*），測其信號強度。當B/F=1，即B/T=50%時的稀釋倍數(shù)的倒數(shù)即為該抗血清、培養(yǎng)上清或腹水液樣本所含抗體的滴度稀。釋倍數(shù)越大，滴度也越高，表明該樣本含有高效價的抗體。 2.交叉反應

只同免疫用的抗原（immunizing antigen, iAg, 免疫原）的一個決定簇結合的抗體稱為無交叉反應抗體。能與iAg以外的其他具有1個或1個以上結構相同或近似的抗原決定簇結合的抗體稱為有交叉反應的抗體；產生交叉反應的抗原稱為交叉反應原（cross reacting antigen, cAg）。交叉反應的程度用交叉反應率（C%）表示，可用下公式計算：交叉反應率（C%）=ED50(cAg)/ED50(iAg)x100%。式中的ED50(cAg)為待鑒定交叉反應原50%結合時的濃度，ED50(iAg)為免疫原50%結合時的濃度。交叉反應曲線的橫坐標應以物質的分子濃度(mol/L)為單位。交叉反應原的種類越少，ED50(cAg)的劑量越大，交叉反應就越小，抗體的特異性就越高。 3.特異性

抗體的特異性是指抗體結合抗原的專一性。只同抗原的一個決定簇結合、可在一級結構、同分異構體結構以及二級和三級機構上區(qū)分不同抗原的抗體稱為高度專一或高度特異的抗體。特異性的高低用C%的大小來確定，C%越小，抗體的特異性越高。 4.親和力

抗體的親和力（affinity）是指一個單價抗體分子與相應抗原的一個決定簇結合的速度、強度和牢固度?？乖涂贵w之間的結合和解離是處在動態(tài)平衡中的，如下式所示：

式中，k1為結合常數(shù)；k2為解離常數(shù)。親和力的大小用親和常數(shù)（affinity constant, Ka）值來表示，Ka=k1/k2。親和常數(shù)Ka的計算最常用的方法是標準作圖法：即以B/F為縱坐標，以B為橫坐標作圖，得到一條直線，其斜率的負數(shù)即為Ka值。Ka越大，提示一個單價抗體分子與相應抗原的一個決定簇結合的速度很快、強度很大和很牢固，不易解離。在測定和計算Ka時，除了考慮抗原抗體的作用外，反應的環(huán)境因素如pH等通過對抗原抗體之間分子鍵、引力和范德華引力等的影響，也不能忽視。 親和力（avidity）是指多價抗體與具有多個抗原決定簇的相應抗原結合的總的速度、強度和牢固度，應大于而各個單價抗體和單個決定簇抗原Ka的總和。