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Polyplus轉(zhuǎn)染試劑jetMESSENGER的作用有哪些呢?

2023-08-09 11:05 作者:百奧創(chuàng)新  | 我要投稿

jetMESSENGR?是一種高效溫和的mRNA轉(zhuǎn)染試劑。與DNA轉(zhuǎn)染相比,mRNA轉(zhuǎn)染具有許多優(yōu)點(diǎn):

★??沒(méi)有基因組整合的風(fēng)險(xiǎn),因此轉(zhuǎn)染細(xì)胞沒(méi)有基因組修飾;

★ ?無(wú)啟動(dòng)子調(diào)控問(wèn)題;

★ ?無(wú)需到達(dá)細(xì)胞核進(jìn)行有效表達(dá);

★ ?更溫和的過(guò)程;

Polyplus轉(zhuǎn)染試劑jetMESSENGER的作用有哪些呢?

一、mRNA?轉(zhuǎn)染

jetMESSENGER?非常適合通過(guò)mRNA轉(zhuǎn)染在神經(jīng)元、原代細(xì)胞、干細(xì)胞和各種癌癥細(xì)胞系等難以轉(zhuǎn)染的細(xì)胞中表達(dá)基因(圖1和圖2)。

圖1?jetMESSENGER?介導(dǎo)的不同難以轉(zhuǎn)染細(xì)胞的轉(zhuǎn)染。轉(zhuǎn)染后48小時(shí)通過(guò)熒光顯微鏡分析各種細(xì)胞系。使用jetMESSENGER?/eGFP mRNA(5meC,偽尿苷,Trilink?)?根據(jù)制造商的建議。有關(guān)OVCAR-3、NCCIT、MDA-MB-231和SW1353細(xì)胞系的數(shù)據(jù)由Inserm U1199?BioTICLA?(法國(guó)卡昂)提供。

圖2?jetMESSENGER?適用于轉(zhuǎn)染原代小鼠肺上皮細(xì)胞中的mRNA。轉(zhuǎn)染后48小時(shí)通過(guò)熒光顯微鏡分析原代肺細(xì)胞。使用jetMESSENGER?用核GFP和mCherry的修飾RNA進(jìn)行共轉(zhuǎn)染。數(shù)據(jù)由美國(guó)威爾康奈爾醫(yī)學(xué)院的T.Itkin提供。

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二、神jing病學(xué)應(yīng)用

jetMESSENGER?能夠在原代神經(jīng)元中實(shí)現(xiàn)高轉(zhuǎn)染效率,同時(shí)在幾天內(nèi)保持生理和健康的細(xì)胞形態(tài),允許在神jing病學(xué)應(yīng)用中長(zhǎng)期表達(dá)(圖3)。

圖3?jetMESSENGER?適用于轉(zhuǎn)染原代大鼠皮層神經(jīng)元的信使核糖核酸。轉(zhuǎn)染后48小時(shí),通過(guò)亮場(chǎng)和熒光顯微鏡分析原代大鼠皮層神經(jīng)元。使用jetMESSENGER?/eGFP信使核糖核酸(5meC,偽尿苷,Trilink?)?根據(jù)制造商的建議。

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三、CRISPR/Cas9應(yīng)用

jetMESSENGER?非常適合使用CRISPR/Cas9進(jìn)行基于RNA的基因組編輯。

四、細(xì)胞重編程

用jetMESSENGER?轉(zhuǎn)染的細(xì)胞顯示出高活力和感興趣蛋白質(zhì)的長(zhǎng)期表達(dá),使jetMESSENGER?成為重編程研究的理想轉(zhuǎn)染試劑?,F(xiàn)在可以將身體的任何細(xì)胞轉(zhuǎn)化為多能干細(xì)胞。例如,可以使用信使核糖核酸轉(zhuǎn)染jetMESSENGER?將成纖維細(xì)胞轉(zhuǎn)化為IP。

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圖4?jetMESSENGER?適用于轉(zhuǎn)染BJ細(xì)胞(人成纖維細(xì)胞)中的mRNA。轉(zhuǎn)染后48小時(shí)通過(guò)亮場(chǎng)和熒光顯微鏡分析BJ細(xì)胞。使用jetMESSENGER?/eGFP信使核糖核酸(5meC,偽尿苷,Trilink?)?根據(jù)制造商的建議。

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