和大家聊聊miRNA酶聯(lián)免疫分析，可能大家不知道m(xù)iREIA是個啥，它的完整名稱是microRNA Enzyme Immunoassay，是BioVendor用于miRNA定量的一種新方法。下面簡單介紹一下：

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microRNA Enzyme Immunoassay（以下簡稱“miREIA”）的檢測原理：

將生物素標(biāo)記的特異性DNA寡核苷酸與樣本中分離出的miRNA雜交。 然后將DNA / RNA雜交體轉(zhuǎn)移到固相上，固相涂有對完美匹配的RNA / DNA-生物素雜交體的特異單克隆抗體。然后將洗滌后的固相與鏈霉親和素-HRP偶聯(lián)物一起孵育，并通過發(fā)色底物?3,3'，5,5'-四甲基聯(lián)苯胺（TMB）進(jìn)行顯色觀察，吸光度與血液樣本中存在的特定miRNA種類的濃度成比。

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同時測試miREIA在各種生物樣品中的性能。使用miREIA試劑盒對從全血，HeLa細(xì)胞，外周血單核細(xì)胞，結(jié)直腸癌組織，關(guān)節(jié)滑液，唾液和尿液樣本中分離的miRNA進(jìn)行定量，結(jié)果表明，該miREIA試劑盒可以很好的對上述所有樣本中的miRNA進(jìn)行定量，檢測結(jié)果如下：

全血樣本中miRNA的分離及定量：將全血收集到PAXgene血液RNA收集管中。 使用RNA分離試劑盒（RIK001）分離RNA，該試劑盒旨在從培養(yǎng)的細(xì)胞，人/動物組織，植物組織和全血中分離RNA。 通過miREIA試劑盒測量了十二種不同miRNA的濃度。

Hela細(xì)胞樣本中miRNA的分離及定量： 使用 RNA分離試劑盒（RIK001）從HeLa細(xì)胞中分離RNA。8種不同miRNA的濃度由miREIA試劑盒測定.

PBMC細(xì)胞樣本中的miRNA定量：采用His-topaque密度梯度離心法從全血中分離外周血單核細(xì)胞(PBMC)。使用RNA分離試劑盒（RIK001）分離RNA。7種不同mirna的濃度由miREIA試劑盒測定.

直腸癌組織樣本中miRNA提取及定量：切除獲得的結(jié)直腸癌(CRC)組織被穩(wěn)定并儲存在RNAlater溶液中。使用RNA分離試劑盒（RIK001）分離RNA。8種不同mirna的濃度由miREIA試劑盒測定.

關(guān)節(jié)滑液樣本中miRNA的分離及定量: 使用血漿/血清RNA分離試劑盒（RIK002）從滑液中分離RNA。 通過miREIA試劑盒測量了五個不同miRNA的濃度.

唾液樣本中miRNA的分離及定量: 使用血漿/血清RNA分離試劑盒（RIK002）從唾液中分離RNA。 通過BioVendor miREIA試劑盒測量了兩種不同的miRNA的濃度.

尿液樣本中miRNA的分離及定量: 使用血漿/血清 RNA分離試劑盒（RIK002）從尿液中分離RNA。通過miREIA試劑盒測量了兩種不同miRNA的濃度。

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miRNA定量的方法——miREIA：https://www.amyjet.com/featured/mireia.shtml