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每日科研進(jìn)展 l 2022.05.15 l

2023-07-13 09:40 作者:RNA生物農(nóng)藥  | 我要投稿


病毒來(lái)源的shRNA可通過(guò)葉面滲透的方式觸發(fā)針對(duì)黃瓜花葉病毒的RNAi機(jī)制


黃瓜花葉病毒(CMV)是全世界傳播最為廣泛的植物病毒之一,其寄主廣泛,可危害高達(dá)100多個(gè)科的1300多個(gè)物種,對(duì)許多作物造成嚴(yán)重?fù)p害和重大損失。目前,對(duì)CMV?的防治主要依靠化學(xué)殺蟲(chóng)劑或是針對(duì)其媒介昆蟲(chóng)進(jìn)行綜合防治,但是隨著昆蟲(chóng)種群抗藥性的產(chǎn)生以及農(nóng)民和消費(fèi)者對(duì)健康風(fēng)險(xiǎn)的逐步關(guān)注,需要設(shè)計(jì)和建立新型的防治策略。

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RNAi技術(shù)通過(guò)下調(diào)病毒基因和植物內(nèi)源性基因的表達(dá),可以產(chǎn)生了很好的防治效果。眾所周知,植物的轉(zhuǎn)錄后基因沉默(PTGS)是一種針對(duì)病原體、特別是針對(duì)病毒的進(jìn)化保守的防御機(jī)制。PTGS可以由病毒復(fù)制過(guò)程中產(chǎn)生互補(bǔ)發(fā)夾結(jié)構(gòu)或由含有與目標(biāo)基因同源序列的dsRNA觸發(fā)。發(fā)夾RNA(hpRNA)誘導(dǎo)的沉默機(jī)制是一種強(qiáng)大的生物技術(shù)工具,可以提高植物對(duì)病毒的抗性。一些研究提供了證據(jù),證明在植物組織上外源性應(yīng)用dsRNA誘導(dǎo)RNAi介導(dǎo)的目標(biāo)基因的沉默。

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圖1. 兩個(gè)具有互補(bǔ)序列的單鏈DNA寡核苷酸經(jīng)過(guò)退火反應(yīng)形成shRNA的示意圖

Bernardo等人于2022年4月29日,在“International journal of Molecular Sciences”雜志上發(fā)表了關(guān)于構(gòu)建基于病毒來(lái)源的shRNA可成功抑制CMV的研究論文。該論文評(píng)估一種dsDNA構(gòu)建體(77bp)作為基于病毒衍生載體體外合成小發(fā)夾RNAs(shRNAs)的方案(圖?1),并測(cè)試它們?cè)谌~面浸潤(rùn)后觸發(fā)煙草對(duì)抗CMV的RNAi機(jī)制的可行性。這種方法可以快速且容易地生產(chǎn)大量的shRNAs。


圖2. shRNA對(duì)CMV發(fā)病率的影響

在這種方法的基礎(chǔ)上,通過(guò)滲透葉面的方式,用shRNAs處理植株葉片,隨后接種CMV,可以實(shí)現(xiàn)對(duì)病毒的防治作用(圖?2),證明這是一種有潛力和價(jià)值的抗病毒策略。

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原文鏈接:

https://doi.org/10.3390/ijms23094938



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