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你了解選擇素elisa試劑盒的實(shí)驗(yàn)原理嗎?

2021-02-25 18:06 作者:蕁夢(mèng)的旅途  | 我要投稿

  選擇素elisa試劑盒是一類異親型結(jié)合、Ca2+依賴的細(xì)胞粘著分子,能與特異糖基識(shí)別并結(jié)合。主要參與白細(xì)胞與血管內(nèi)皮細(xì)胞之間的識(shí)別與粘著。

  實(shí)驗(yàn)原理:

  將目標(biāo)包被于96孔微孔板中,制成固相載體,向微孔中分別加入品或標(biāo)本,其中的目標(biāo)連接于固相載體上的結(jié)合,然后加入微生物化的目標(biāo),將未結(jié)合的生物素洗凈后,加入HRP標(biāo)記和親和素,再次徹底洗滌后加入TMB底物顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的。顏色的深淺和樣品中的目標(biāo)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(O.D.值),計(jì)算樣品濃度。

  精密度:精密度用樣品測(cè)定值的變異系數(shù)CV表示。CV(%)=SD/mean×100

  批內(nèi)差:取同批次選擇素elisa試劑盒對(duì)低、中、高值定值樣本進(jìn)行定量檢測(cè),每份樣本連續(xù)測(cè)定20次,分別計(jì)算不同濃度樣本的平均值及SD值。

  批間差:選取3個(gè)不同批次的試劑盒分別對(duì)低、中、高值定值樣本定量測(cè)定,每個(gè)樣本使用同一試劑盒重復(fù)測(cè)定8次,分別計(jì)算不同濃度樣本的平均值及SD值。

  批內(nèi)差: CV<10% Inter-批間差: CV<13%

  經(jīng)測(cè)定,試劑盒在X期內(nèi)按推薦溫度保存,其活性率小于5%。為減小外部因素對(duì)試劑盒前后檢測(cè)值的影響,實(shí)驗(yàn)室的條件需盡量保持一致,尤其是實(shí)驗(yàn)室內(nèi)溫度、濕度及溫育條件。其次由同一實(shí)驗(yàn)員來進(jìn)行操作可人為誤差。

  選擇素elisa試劑盒識(shí)別的配體都是一些寡糖基團(tuán),迄今為止發(fā)現(xiàn)的配體都是一些具有唾液酸化路易斯寡糖(s-Le,siaglyl-Lewis)或類似結(jié)構(gòu)的分子。一種寡糖基團(tuán)可以存在多種糖蛋白和糖脂分子上,并分布于多種細(xì)胞表面,因此選擇素分子配體在體內(nèi)分布較為廣泛。

  本文轉(zhuǎn)載自http://www.shxinyusw.com/。

選擇素elisa試劑盒


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