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每日科研進展 l 2022.07.21 l 小地老虎幾丁質(zhì)家族基因的鑒定及RNAi功能分析

2023-08-22 09:33 作者:RNA生物農(nóng)藥  | 我要投稿


小地老虎幾丁質(zhì)家族基因的鑒定及RNAi功能分析

幾丁質(zhì)是昆蟲細胞外基質(zhì)的主要成分,其代謝在很大程度上影響昆蟲的發(fā)育和蛻皮。幾丁質(zhì)酶是昆蟲體內(nèi)重要的降解酶,由多個大小、表達模式和功能不同的基因編碼。然而,目前對小地老虎中不同幾丁質(zhì)酶的功能了解較少,阻礙了我們應用新技術將這些基因作為新的害蟲管理策略。

在該研究中,從A.ipsilon轉(zhuǎn)錄組中發(fā)現(xiàn)了11個幾丁質(zhì)酶基因的全長互補DNA序列。雖然這些幾丁質(zhì)酶的結(jié)構(gòu)域差異很大,但它們都包含至少一個幾丁質(zhì)酶催化結(jié)構(gòu)域。


圖 1. 五種昆蟲幾丁質(zhì)酶的系統(tǒng)發(fā)育分析


圖 2. 小地老虎幾丁質(zhì)酶的結(jié)構(gòu)域分析

發(fā)育階段和組織依賴性表達譜表明,大多數(shù)AiCht在蛹期表達最高。此外,AiCht2、AiCht6、AiCht7和AiCht10主要在外皮中表達,而AiCht8和AiCht-h在中腸中的表達最高。


圖 3. 11個AiCht基因的發(fā)育表達模式分析
圖 4. 11個AiCht基因的組織表達模式分析

RNAi實驗表明,敲除AiCht10或生長因子相關基因(AiIDGF)會導致較高的幼蟲死亡率。


圖 5. 11個AiCht基因RNAi抑制后對小地老虎的致死率分析

注射以AiCht10為靶點的dsRNA(dsAiCht10)后,幼蟲在蛻皮過程中未能脫落舊角質(zhì)層,而注射以AiIDGF為靶點的dsRNA(dsAiIDGF)后,幼蟲體收縮并變黑。


圖 6. AiCht10和AiIDGF基因RNAi后對幼蟲發(fā)育的影響

該研究結(jié)果首次揭示了AiCht10和AiIDGF在小地老虎中的重要作用。這些基因?qū)τ紫x發(fā)育至關重要,有可能成為基于RNAi的害蟲管理的新靶點。


原文鏈接:

https://doi.org/10.1002/ps.7047

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