Worthington代理商艾美捷木瓜蛋白酶的說明及應(yīng)用
木瓜蛋白酶是一種半胱氨酸水解酶,在廣泛的條件下穩(wěn)定且具有活性。即使在高溫下它也非常穩(wěn)定(Cohen et al. 1986)。Carica papaya的乳膠富含四種半胱氨酸內(nèi)肽酶,包括木瓜蛋白酶、木瓜凝乳蛋白酶、甘氨酰內(nèi)肽酶和?caricain。這些蛋白質(zhì)被合成為無活性的前體,在植物受傷并排出乳膠后兩分鐘內(nèi)變得活躍。木瓜蛋白酶是一種次要成分,但因其更容易純化而得到更廣泛的研究(Azarkan 2003)。
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木瓜蛋白酶是具有三個(gè)二硫鍵和酶活性所必需的巰基的單鏈多肽。木瓜蛋白酶被表達(dá)為一種無活性的前體,prepropapain?;钚阅竟系鞍酌傅男纬尚枰獛讉€(gè)切割步驟,包括首先切割?18?個(gè)氨基酸前區(qū)(信號序列),然后進(jìn)一步切割糖基化的?114?個(gè)氨基酸前區(qū)。該前區(qū)用作內(nèi)在抑制劑和折疊模板。
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Worthington?艾美捷木瓜蛋白酶特異性:
它具有內(nèi)肽酶、酰胺酶和酯酶活性?;钚晕稽c(diǎn)由七個(gè)亞位點(diǎn)(S 1 -S 4和?S 1' -S 3')組成,每個(gè)亞位點(diǎn)可以容納底物的一個(gè)氨基酸殘基(P 1 -P 4和?P 1' -P 3')(Schechter和伯杰?1967)。特異性由?S 2亞位點(diǎn)控制,S 2?亞位點(diǎn)是一個(gè)容納底物?P 2側(cè)鏈的疏水袋。木瓜蛋白酶表現(xiàn)出特定的底物偏好,主要是對該子位點(diǎn)的大量疏水或芳香殘基(Kimmel?和?Smith 1954)。在?S 2之外子位點(diǎn)偏好,活性位點(diǎn)內(nèi)缺乏明確定義的殘基選擇性。
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Worthington?艾美捷木瓜蛋白酶分子特征:
所有木瓜蛋白酶的成熟形式都在?212?到?218?個(gè)氨基酸之間,并表現(xiàn)出很強(qiáng)的同源性?(Azarkan 2003)。X?射線結(jié)構(gòu)分析表明它們采用相同的三維折疊(Pickersgill?等人?1991、O'Hara?等人?1995?和?Maes?等人1996)。
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木瓜蛋白酶被合成為具有?133?個(gè)氨基酸的?N?末端區(qū)域的酶原,該區(qū)域不是活性酶的一部分(Cohen?等人?1986)。木瓜蛋白酶前體基因?prepropapain?已被克隆并部分或整體表達(dá)(Cohen?等人?1986?和?Choudhury?等人2009)。
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Worthington?艾美捷木瓜蛋白酶應(yīng)用:
比其他蛋白酶更溫和的細(xì)胞分離(即:皮質(zhì)神經(jīng)元、視網(wǎng)膜和平滑?。?/p>
蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)研究、肽圖分析
用于抗體篩選或鑒定的紅細(xì)胞表面修飾
從?IgG?和?IgM?抗體制備?Fab
整合膜蛋白的溶解
從純化的蛋白聚糖生產(chǎn)糖肽
酶促傷口清創(chuàng)
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Worthington專注于生物技術(shù)和生命科學(xué)研究,診斷,生物制藥和生物加工應(yīng)用的高質(zhì)量純化酶,蛋白質(zhì),核酸和試劑盒。其核心酶包括:膠原蛋白酶,脫氧核糖核酸酶I,彈性蛋白酶,木瓜蛋白酶,核糖核酸酶,胰蛋白酶等。艾美捷科技是Worthington的中國代理商,為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù)。