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蛋白質(zhì)組學(xué)三大基本技術(shù):揭示分子機制的質(zhì)譜分析

2023-09-22 13:33 作者:BTP生物科技  | 我要投稿

蛋白質(zhì)組學(xué)作為生物制品領(lǐng)域中的重要研究領(lǐng)域,關(guān)注著生物體內(nèi)所有蛋白質(zhì)的全集,從而幫助我們深入了解細(xì)胞和生物體內(nèi)的分子機制。在蛋白質(zhì)組學(xué)的研究中,質(zhì)譜分析是三大基本技術(shù)之一,其高效準(zhǔn)確地鑒定蛋白質(zhì)樣本,檢測蛋白質(zhì)修飾和相互作用等,為解析蛋白質(zhì)組學(xué)提供了強有力的手段。

1.二維凝膠電泳:

二維凝膠電泳是蛋白質(zhì)組學(xué)最早采用的技術(shù)之一,它通過將蛋白質(zhì)樣本按照等電點和分子量進行分離,從而形成二維蛋白質(zhì)圖譜。在第一維度中,蛋白質(zhì)樣本根據(jù)等電點電荷進行分離,而在第二維度中,則是根據(jù)分子量進行分離。通過對二維凝膠電泳圖譜進行分析,可以初步確定蛋白質(zhì)的存在與否,檢測蛋白質(zhì)的變化以及發(fā)現(xiàn)潛在的蛋白質(zhì)標(biāo)記。

2.基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行時間質(zhì)譜(MALDI-TOF MS):

質(zhì)譜技術(shù)是蛋白質(zhì)組學(xué)中最為重要的技術(shù)之一,其中MALDI-TOF MS是其中一種常用的質(zhì)譜方法。這種技術(shù)通過將蛋白質(zhì)樣本與基質(zhì)混合,然后經(jīng)過激光照射,使得蛋白質(zhì)和基質(zhì)一起形成荷質(zhì)比特征峰。之后,這些帶電的蛋白質(zhì)離子會根據(jù)其荷質(zhì)比在飛行時間上產(chǎn)生差異,通過測量這些離子的飛行時間和質(zhì)荷比,可以確定蛋白質(zhì)的分子量。MALDI-TOF MS能夠高通量快速地鑒定蛋白質(zhì)樣本,是蛋白質(zhì)組學(xué)中的重要工具。

3.液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜(LC-MS/MS):

液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜是質(zhì)譜技術(shù)中的另一重要方法。與MALDI-TOF MS相比,LC-MS/MS可以更加準(zhǔn)確地鑒定復(fù)雜樣本中的蛋白質(zhì)。這種技術(shù)先通過液相色譜對蛋白質(zhì)樣本進行分離,然后將分離得到的蛋白質(zhì)逐個送入串聯(lián)質(zhì)譜進行碎片化。隨后,通過測量這些蛋白質(zhì)片段的質(zhì)荷比,可以推測原始蛋白質(zhì)的氨基酸序列,從而確定蛋白質(zhì)的身份。LC-MS/MS的高靈敏度和高分辨率使得它成為分析復(fù)雜樣本中蛋白質(zhì)的理想選擇。

通過上述三大基本技術(shù),蛋白質(zhì)組學(xué)能夠深入揭示生物體內(nèi)蛋白質(zhì)的表達、結(jié)構(gòu)、功能以及相互作用等重要信息,為生物制品領(lǐng)域的研究和醫(yī)學(xué)應(yīng)用提供了強大的支持。


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