2020年新冠疫情爆發(fā)，抗體以及重組蛋白的研究成為熱點(diǎn)，真核表達(dá)系統(tǒng)293F成為大家研究的熱點(diǎn)。

? ? ?His-標(biāo)簽在蛋白純化中使用廣泛，但在真核表達(dá)系統(tǒng)中，由于大部分哺乳動(dòng)物細(xì)胞或者昆蟲細(xì)胞培養(yǎng)基中含有螯合劑成分，致使培養(yǎng)上清無法直接上鎳柱，否則會(huì)出現(xiàn)脫鎳（鎳柱變成白色），蛋白無法純化等問題。

可以用以下幾種方法處理：

1、濃縮后透析置換緩沖液去除螯合劑；

2、先過離子交換柱、疏水柱等，然后過鎳柱；

3、在確定目的蛋白耐酸的情況下，調(diào)至弱酸性后加入適當(dāng)濃度CuSO4，結(jié)合螯合劑，然后過鎳柱（下圖為此方法處理后得到的結(jié)果）