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每日科研進(jìn)展 l 2022.07.29 l RNAi介導(dǎo)的茶尺蠖解毒相關(guān)基因沉默

2023-08-24 11:25 作者:RNA生物農(nóng)藥  | 我要投稿


RNAi介導(dǎo)的茶尺蠖解毒相關(guān)基因沉默

茶尺蠖是以茶葉為食的主要害蟲之一。目前,主要的防治方法是化學(xué)防治,但長(zhǎng)期使用殺蟲劑會(huì)使得害蟲產(chǎn)生抗藥性。抗性機(jī)制之一是相關(guān)解毒酶的上調(diào)。

在本研究中,從溴氰菊酯處理的斜紋夜蛾幼蟲轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)注釋的基因序列中篩選出四個(gè)表達(dá)增加的基因,分別是酸性磷酸酶EoACP138和細(xì)胞色素P450EoCYP316、羧酸酯酶EoCarE592和乙酰膽堿酯酶EOACH989。

分別用溴氰菊酯、毒死蜱和甲氰菊酯刺激斜紋夜蛾4齡幼蟲,用qRT-PCR檢測(cè)基因表達(dá)水平。結(jié)果表明,在三種殺蟲劑的刺激下,這四個(gè)基因的表達(dá)都顯著增加。


圖 1. 毒死蜱、溴氰菊酯和甲氰菊酯刺激后四齡幼蟲的相關(guān)基因表達(dá)情況

利用RNAi技術(shù)沉默了斜紋夜蛾四齡幼蟲EoACP138、EoCYP316、EoCarE592和EoAchE989基因的表達(dá)。通過(guò)qRT-PCR測(cè)定了經(jīng)dsRNA處理和農(nóng)藥刺激的幼蟲中上述基因表達(dá)水平的變化。在取食dsRNA后,靶基因被有效沉默。


圖 2. RNAi抑制解毒相關(guān)基因的效率分析


圖 3. 飼喂dsRNA后對(duì)茶尺蠖死亡率統(tǒng)計(jì)

通過(guò)隨后的生物測(cè)定分析發(fā)現(xiàn),在受dsRNA干擾的幼蟲中觀察到對(duì)農(nóng)藥更高的敏感性和更高的死亡率。

圖 4. RNAi干擾相關(guān)解毒基因后茶尺蠖對(duì)農(nóng)藥的耐受性分析

上述基因與斜紋夜蛾的解毒代謝有關(guān),為進(jìn)一步研究斜紋夜蛾的抗藥性機(jī)制奠定了基礎(chǔ)。


原文鏈接:

https://doi.org/10.3390/genes13071141


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