氧化酶測試（ 原理、組成、結(jié)果解釋）
氧化酶測試是用于確定細胞色素 c 氧化酶存在的程序。 該系統(tǒng)的作用是幫助氧化還原染料四甲基對苯二胺和細菌的電子供體之間的電子移動。
它有助于識別能夠產(chǎn)生細胞色素 c 氧化酶的細菌； 存在于細菌電子傳遞鏈中的一種酶。 它被稱為氧化酶測試，因為如果酶存在，酶不會導(dǎo)致試劑氧化，從而產(chǎn)生紫色的最終產(chǎn)物（吲哚酚）。
如果沒有發(fā)現(xiàn)酶，就沒有氧化。 因此，試劑的顏色保持不變。
圖片 1：圖片顯示了用于氧化酶測試的需氧菌。
注意：氧化酶測試呈陽性的細菌是好氧的。 他們可以在呼吸中利用氧氣。 另一方面，氧化酶測試呈陰性的細菌可以是需氧的、厭氧的或兼性的。這意味著這些生物體沒有試劑氧化所需的酶細胞色素 c 氧化酶。
需要準備
帶基材的濕濾紙
紙盤（市售）
由木頭或鉑金制成的線材
試劑如：
? ? ? ? ? 科瓦奇氧化酶試劑
? ? ? ? ?戈登和麥克勞德試劑
? ? ? ? ?Gaby and Hadley（靛酚氧化酶）試劑
氧化酶檢測的目的
它有助于確定生物體是否具有細胞色素氧化酶。
它有助于區(qū)分某些細菌菌株，如莫拉菌屬、奈瑟菌屬、巴氏桿菌屬和彎曲桿菌屬。
它有助于區(qū)分假單胞菌和其他相關(guān)物種。
圖 2：濕濾法氧化酶測試。
圖 3：干濾法氧化酶測試。
圖 4：直接平板法氧化酶測試。
圖 5：拭子法氧化酶測試。
圖 6：試管法氧化酶試驗。
步驟
可以使用各種方法進行氧化酶測試。我們將在下面討論常用的方法。
1.干濾紙——這是最方便的方法。程序如下：
將濾紙（Whatman's #1）浸泡在 1% 的四甲基對苯二胺二鹽酸鹽溶液中。
瀝干約半分鐘。
將濾紙冷凍干燥，裝入瓶中；最好是深色的，并帶有用螺釘固定的蓋子。
如果使用，必須取出試紙條，用蒸餾水潤濕試紙條并放入培養(yǎng)皿中。
使用環(huán)（鉑），挑選菌落并涂抹在潮濕的部分。
2.濕濾紙——之所以稱為濕濾紙法，是因為濾紙浸泡在 1% 的試劑溶液中。使用環(huán)（由鉑材料制成）在濾紙上摩擦培養(yǎng)物。
3.直接板 - 添加試劑；理想情況下，將兩到三滴滴到瓊脂板上的可疑菌落上。只需添加足夠的試劑，因為添加過多的試劑會改變結(jié)果。注意 10 秒內(nèi)顏色的任何變化。這種類型的氧化酶測試應(yīng)該在瓊脂板上進行（非選擇性）。
4.拭子法——拭子應(yīng)浸入試劑中，并應(yīng)與疑似分離菌落接觸。注意 10 秒內(nèi)顏色的任何變化。
5.試管——新鮮的細菌培養(yǎng)物在營養(yǎng)肉湯（4.5 ml）中生長。生長應(yīng)在 18 至 24 小時內(nèi)完成。加入 Gaby 和 Hadley 試劑（0.2ml）。搖動試管以確?；旌衔锍浞只旌喜⑶遗囵B(yǎng)物充分充氧。注意顏色的任何變化。
結(jié)果解釋
陽性 - 如果您在 10 秒內(nèi)注意到強烈的深紫色色調(diào)，則結(jié)果為陽性。
延遲陽性 – 如果深紫色在 60 秒內(nèi)出現(xiàn)。
陰性 – 如果顏色完全沒有變化或在 60 秒后發(fā)生變化，則結(jié)果為陰性。
