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細(xì)胞進(jìn)階講解—4T1

2023-07-13 21:04 作者:泰澤科研小可愛  | 我要投稿

內(nèi)容來(lái)自于4T1 Cell - Cell Infor

4T1是一種可移植的小鼠乳腺癌細(xì)胞系。它被廣泛地用作體外腫瘤模型,用于研究人類乳腺癌。4T1細(xì)胞有高度的侵襲性和腫瘤形成能力;它們傾向于從乳腺的原發(fā)腫瘤部位轉(zhuǎn)移至其他部位,包括肝臟、淋巴結(jié)、肺、骨骼和腦部,因此是研究乳腺癌轉(zhuǎn)移的理想選擇。[1]


1.4T1細(xì)胞的來(lái)源和一般特征
在使用細(xì)胞系之前,了解細(xì)胞系的來(lái)源和一般特征至關(guān)重要。在本節(jié)中,我們介紹了4T1乳腺癌細(xì)胞的基礎(chǔ)知識(shí)。例如,什么是4T1細(xì)胞?4T1細(xì)胞系的特征是什么?4T1細(xì)胞系的起源是什么?4T1細(xì)胞系的形態(tài)是什么?

  • 4T1是一種乳腺腫瘤細(xì)胞系,起源于BALB/c小鼠的自發(fā)性乳腺腫瘤。這些高度侵襲性和腫瘤原性的細(xì)胞在生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移擴(kuò)散方面,與人類乳腺癌的行為非常相似。具體而言,4T1腫瘤模型研究三陰性乳腺癌(TNBC)。

  • 4T1細(xì)胞是粘附性的,具有上皮細(xì)胞樣形態(tài)。

4T1與EMT-6細(xì)胞系比較
4T1和EMT-6是非免疫原性的小鼠細(xì)胞模型,用于三陰性乳腺癌的研究。在這里,4T1細(xì)胞是比EMT-6更具侵襲性的腫瘤細(xì)胞[2]。

4T1與4T07細(xì)胞比較
4T07也是小鼠癌細(xì)胞系。4T1細(xì)胞和4T07細(xì)胞之間的主要區(qū)別在于,4T1細(xì)胞可以離開原發(fā)腫瘤部位并擴(kuò)散形成可見的繼發(fā)性轉(zhuǎn)移灶,而4T07細(xì)胞盡管離開原發(fā)部位但不能形成可見的轉(zhuǎn)移灶[3]。


2.A431細(xì)胞系:培養(yǎng)信息
4T1乳腺癌細(xì)胞系在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中具有廣泛的研究應(yīng)用。為了培養(yǎng)這些細(xì)胞,您需要了解以下關(guān)鍵點(diǎn):什么是4T1細(xì)胞的倍增時(shí)間?如何培養(yǎng)4T1細(xì)胞?4T1的細(xì)胞種植密度是多少?

培養(yǎng)A431細(xì)胞的關(guān)鍵要點(diǎn)
倍增時(shí)間:4T1乳腺癌細(xì)胞的倍增時(shí)間在14小時(shí)。
生長(zhǎng)特性:4T1是一種貼壁型細(xì)胞系。
傳代建議:對(duì)于4T1三陰性乳腺癌細(xì)胞系,建議采用1:6和1:8的傳代比例。在傳代時(shí),用PBS洗滌細(xì)胞,并用Accutase酶孵育8至10分鐘。分散的細(xì)胞通過(guò)離心收集,并在新的培養(yǎng)基中重懸。重新懸浮的細(xì)胞被分裝到新培養(yǎng)瓶中進(jìn)行生長(zhǎng)。
培養(yǎng)基:RPMI 1640培養(yǎng)基用于培養(yǎng)4T1細(xì)胞。在培養(yǎng)基中添加10%的胎牛血清(FBS)、2.0g/L NaHCO3和2.1mMstable Glutamine可促進(jìn)細(xì)胞的理想生長(zhǎng)。
生長(zhǎng)條件:4T1乳腺癌細(xì)胞在配備5%CO2氣體供應(yīng)的濕度控制培養(yǎng)箱中生長(zhǎng),溫度為37°C。儲(chǔ)存:凍存的4T1細(xì)胞需保持在-150°C以下的溫度,可以是液氮或冰箱,以保持細(xì)胞的存活能力。
凍存建議:4T1細(xì)胞的高度推薦的冷凍培養(yǎng)基是CM-1或CM-ACF。通過(guò)緩慢冷凍的方法來(lái)冷凍細(xì)胞,每分鐘僅允許降低1°C的溫度,以保持細(xì)胞活力。
復(fù)蘇建議:將冷凍細(xì)胞瓶放在37℃的水浴中約數(shù)秒鐘,直到細(xì)胞解凍,只留下少量的冰塊。這些細(xì)胞被重新懸浮在新鮮培養(yǎng)基中,并倒入培養(yǎng)瓶中進(jìn)行培養(yǎng)。孵育24小時(shí)后更換培養(yǎng)基,以去除冷凍培養(yǎng)基成分。
生物安全等級(jí):建議使用生物安全級(jí)別一來(lái)處理和維護(hù)4T1培養(yǎng)物。

小鼠4T1乳腺癌細(xì)胞,放大20倍和10倍


3.4T1細(xì)胞的優(yōu)點(diǎn)和缺點(diǎn)
4T1細(xì)胞系具有獨(dú)特的特點(diǎn),并提供了幾個(gè)優(yōu)點(diǎn)和缺點(diǎn)。以下是我們總結(jié)的一些。

優(yōu)點(diǎn):
①致瘤性: ?
4T1是一種高度致瘤的細(xì)胞系。這些細(xì)胞具有在小鼠體內(nèi)注射后,形成適于乳腺癌研究的4T1同種移植小鼠模型的能力。因此,4T1模型是理想用于研究腫瘤的發(fā)展、生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移的,并且有助于篩選和評(píng)估治療藥物。
②體外轉(zhuǎn)移模型: ?
4T1模型具有天然的轉(zhuǎn)移傾向,這使得研究人員能夠有效地調(diào)查轉(zhuǎn)移過(guò)程中涉及的潛在機(jī)制和途徑。此外,4T1細(xì)胞對(duì)6-巰基嘌呤具有抵抗力。與其他模型相比,這有助于有效檢測(cè)微小轉(zhuǎn)移細(xì)胞,提高精度。因?yàn)樗朔Q量目標(biāo)器官和計(jì)算結(jié)節(jié)的需要。

缺點(diǎn):
①侵略性/快速生長(zhǎng)率: ?
4T1細(xì)胞系是一種高度侵襲性的三陰性乳腺癌細(xì)胞系。由于生長(zhǎng)速度快,在長(zhǎng)期實(shí)驗(yàn)和控制實(shí)驗(yàn)變量中使用這種細(xì)胞系變得具有挑戰(zhàn)性。


4.4T1細(xì)胞的研究應(yīng)用
4T1小鼠模型細(xì)胞系是研究癌癥生物學(xué)和評(píng)估新療法的有價(jià)值的研究工具。4T1細(xì)胞的主要應(yīng)用如下:

癌癥生物學(xué):4T1細(xì)胞系被廣泛用于研究癌癥的發(fā)展和生長(zhǎng)。它是研究和探索不同的細(xì)胞和分子機(jī)制參與腫瘤進(jìn)展和轉(zhuǎn)移的理想體外模型。此外,它可揭示這些過(guò)程中細(xì)胞信號(hào)通路、微環(huán)境和基因表達(dá)的作用。2019年進(jìn)行的研究使用4T1細(xì)胞發(fā)現(xiàn)了癌細(xì)胞侵襲和遷移的驅(qū)動(dòng)機(jī)制。結(jié)果表明STAT3、MMP2和MMP9基因參與其中,這些基因的抑制可以顯著限制癌細(xì)胞的遷移和侵襲[4]。類似的研究也表明在腫瘤發(fā)展和轉(zhuǎn)移中涉及到其他幾條信號(hào)通路。

癌癥治療研究:4T1細(xì)胞系被廣泛用于癌癥治療研究中的篩選和評(píng)估新療法。一項(xiàng)研究探討了迷迭香提取物(Rosemary-FeNPs)和純迷迭香提取物中綠色合成的鐵納米顆粒對(duì)4T1細(xì)胞系的細(xì)胞毒性潛力。研究結(jié)果提出Rosemary-FeNPs比純提取物更有希望[5]。類似地,2021年的一項(xiàng)研究研究了生姜提取物在4T1乳腺癌細(xì)胞和4T1小鼠模型中的抗腫瘤潛力[6]。


5.4T1細(xì)胞:研究文獻(xiàn)
以下將介紹一些有趣和被引用最多的關(guān)于4T1細(xì)胞的出版物。

采用M.longifolia制備的AgNPs對(duì)4T1細(xì)胞系的潛在抗增殖活性:通過(guò)ROS生成和細(xì)胞膜損傷
此研究于2018年發(fā)表在《光化學(xué)與光生物學(xué)雜志》上。研究認(rèn)為,采用Madhuca longifolia制備的銀納米顆粒通過(guò)細(xì)胞壁降解和ROS產(chǎn)生對(duì)4T1腫瘤細(xì)胞表現(xiàn)出一種抗增殖作用。

毛蕊花糖苷對(duì)乳腺癌4T1細(xì)胞系的細(xì)胞毒性和凋亡作用
這項(xiàng)在2021年發(fā)表于BMC藥理學(xué)和毒理學(xué)雜志的研究提出,一種天然化合物——毛蕊花糖苷通過(guò)TLR4信號(hào)傳導(dǎo)對(duì)4T1乳腺癌細(xì)胞表現(xiàn)出一種凋亡效應(yīng)。

Eupatorin抑制了4T1小鼠乳腺癌模型的腫瘤進(jìn)展并增強(qiáng)了免疫功能
此研究于2020年發(fā)表在《綜合癌癥治療》上。該研究使用4T1細(xì)胞系發(fā)展了一個(gè)4T1同源移植小鼠模型,并用它來(lái)探索Eupatorin的抗癌潛力。Eupatorin延遲了4T1小鼠模型的腫瘤進(jìn)展。

Viola odorata提取物對(duì)4T1乳腺癌模型的腫瘤生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移的抑制作用
這項(xiàng)研究發(fā)表于2018年的《伊朗藥物研究雜志》,提出了一種醫(yī)用草藥Viola odorata對(duì)4T1細(xì)胞的潛在細(xì)胞毒性作用。

紫杉醇固體脂質(zhì)納米粒載藥抑制4T1小鼠乳腺癌細(xì)胞的腫瘤生長(zhǎng)和肺轉(zhuǎn)移
這項(xiàng)研究提出,固體脂質(zhì)納米粒載藥的紫杉醇(DTX-loaded SLNs)可以是治療乳腺癌和預(yù)防其轉(zhuǎn)移的有前途的藥物,因?yàn)樗鼈兿拗屏?T1細(xì)胞的腫瘤生長(zhǎng)和肺轉(zhuǎn)移。


6.4T1細(xì)胞系的資源:實(shí)驗(yàn)方案、視頻等
有關(guān)4T1細(xì)胞的在線資源有限,以下是其中一些。

轉(zhuǎn)染4T1細(xì)胞:這個(gè)視頻是一步一步地指導(dǎo)如何進(jìn)行4T1細(xì)胞系的轉(zhuǎn)染。
細(xì)胞系的傳代:這個(gè)視頻介紹了鐵壁細(xì)胞系的傳代方案。

以下鏈接包含了4T1細(xì)胞系的細(xì)胞培養(yǎng)協(xié)議:
4T1細(xì)胞系:這個(gè)網(wǎng)站鏈接包含了所有有用的關(guān)于處理4T1細(xì)胞系的信息。它有關(guān)于培養(yǎng)基的信息,冷凍保存細(xì)胞系和增殖細(xì)胞系的處理方案。


參考文獻(xiàn)

  1. Pulaski, B.A. and S. Ostrand-Rosenberg, Mouse 4T1 breast tumor model. Curr Protoc Immunol, 2001. Chapter 20: p. Unit 20.2.

  2. Maxwell, K.G., Immunomodulation of Breast Cancer Cells for Whole Tumor Vaccination. 2016.

  3. Walker, I., et al., Mammary tumors induce central pro-inflammatory cytokine expression, but not behavioral deficits in Balb/C mice. Scientific Reports, 2017. 7(1): p. 1-13.

  4. Li, Y., et al., Inhibition of Stat3 signaling pathway by natural product pectolinarigenin attenuates breast cancer metastasis. Frontiers in Pharmacology, 2019. 10: p. 1195.

  5. Farshchi, H.K., et al., Green synthesis of iron nanoparticles by Rosemary extract and cytotoxicity effect evaluation on cancer cell lines. Biocatalysis and agricultural biotechnology, 2018. 16: p. 54-62.

  6. Gholizadeh, A.P., et al., Effect of Ginger Extract on 4T1 Breast Cancer Cell Line in Balb/c Mouse. Clinical Cancer Drugs, 2021. 8(1): p. 43-49.


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