PCR是怎樣完成擴(kuò)增的呢?PCR是聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（Polymerase Chain Reaction），實(shí)驗(yàn)過程是利用一段DNA為模板，在DNA聚合酶和核苷酸底物的共同參與下，將該段DNA擴(kuò)增至足夠的數(shù)量，以便進(jìn)行結(jié)構(gòu)和功能的分析。

若我們想要分析/探索基因的遺傳信息，則需要大量的DNA片段，例如動物的組織；兇手的毛發(fā)、血液、皮膚；古生物；歷史殘??；患者的組織等，可能只能分離出少量的DNA，若想研究其遺傳信息，有著很大的阻礙和困難，在1985年，出現(xiàn)了一種方法：可以在短時間內(nèi)大量復(fù)制DNA片段，此方法為PCR，它能將很微量的遺傳物質(zhì)在數(shù)小時內(nèi)擴(kuò)增數(shù)百倍達(dá)到檢測水平，那么PCR是怎樣完成擴(kuò)增的呢??讓我們來一起學(xué)習(xí)一下吧！

1.高溫變性

變性的目的是使模板DNA雙鏈解旋成為單鏈以便與引物結(jié)合。此步驟將溶液加熱至94-98C并保持20-30秒，破壞兩條鏈之間的氫鍵并生成單鏈 DNA 分子;同時也激活了DNA 聚合酶，該步驟的時間取決于所使用的聚合酶。

2.低溫退火

退火溫度取決于所用引物的Tm，一般比引物Tm低3-5C左右。該步驟將持續(xù)約 20-40 秒，當(dāng)反應(yīng)溫度隆低到50-65C時，引物與互補(bǔ)的DNA單鏈序列形成氫鍵，DNA聚合酶會結(jié)合至引物-模板雙鏈處開始DNA合成。

3.中溫延伸

延伸時間取決于目的DNA片段的長度和DNA聚合酶的合成能力。一般而言DNA聚合酶每60秒能夠合成1kb長度的DNA。DNA模板-引物結(jié)合物在Taq DNA聚合酶的作用下，沿著5’一3’的方向合成一條與模板DNA鏈互補(bǔ)的鏈。延伸時的溫度通常為72C。

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