玉米whirly1蛋白的PET28A融合表達(dá)載體

1、WHIRLY1基因CDS序列查找ncbi

ncbi>Nucieotide（外顯子基因編碼序列）

下拉找到CDS>CDS

atg起始密碼子

tga終止密碼子

右下角Fasta

酶切位點(diǎn)的選擇：

1、兩個(gè)酶切位點(diǎn)離的越遠(yuǎn)越好，離得越遠(yuǎn)，酶切效率越高

2、酶切位點(diǎn)不能在插入序列中有所出現(xiàn)

加粗的是只有一個(gè)酶切位點(diǎn)，不加粗的是不止出現(xiàn)一次的酶切位點(diǎn)

把兩個(gè)酶切位點(diǎn)之間的序列刪除掉（保留兩邊的酶切位點(diǎn)）

兩個(gè)序列方向不一致，需要把其中一個(gè)序列方向倒置（倒置whirly1序列）

全選whirly1序列，新建勾選Reverse complease（反向序列）或者插入序列時(shí)勾選Reverse complease（反向序列）

引物包含酶切位點(diǎn)，引物序列一般在18~25bp

終止密碼子要去掉

連續(xù)融合表達(dá)His標(biāo)簽